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CRISPR-Cas9系统简介
2019-05-07 08:57  
Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)——规律成簇的间隔短回文重复和CRISPR-associated protein 9(Cas9),共同组成了一套系统,是细菌用来防御噬菌体DNA注入和质粒转移的天然防御系统。但现在被人类所重新利用,构建了很强的RNA引导的DNA靶向平台——主要用来基因组编辑、转录扰乱、表观遗传调控等。
 

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图中是细菌天然免疫系统。新疆福利彩票网可以看到,CRISPR locus是由几个原件构成。一开始是个反向转录的RNA,是特异的非编码RNA,可以和重复序列部分互补(trancrRNA,橙色矩形),后面是各种cas基因(箭头表示),接着是CRISPR排列(棕色的菱形是重复序列,彩色的是间隔)。而这些间隔序列是细菌从噬菌体DNA中获得的遗传原件: 当噬菌体感染细菌,细菌激活相关的cas基因——Cas1,Cas2,和Csn2,将其中新的间隔序列整合到自身的CRISPR arry中。一旦获得以后,新的spacer就会出现在pre-crRNA中,此时tracrRNA与不同的SPACER互补,在RNaseIII的作用下,产生crRNA,进一步在其他未知的核酸酶的作用,剪切crRNA的5'端,使得引导序列长为20nt。如果噬菌体注入DNA,那么这个免疫系统将被激活,来干扰噬菌体DNA。
 

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